생명과학실험1-03 polyacrylamide gel 만들기

소개글

polyacrylamide gel 을 만드는 과정에 대한 실험 내용입니다.
SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동을 준비하는 과정으로 전기영동이 일어나는 장소인 gel을 만드는 과정에 대해 자세히 찾아보았습니다.

보다 정확하고 쉬운 이해를 위해 직접 그린 그림도 첨부되어 들어가 있습니다.

전기영동 시 불연속 버퍼 시스템을 사용하는 이유와 그 정의에 대한 설명도 첨부하였습니다.

대부분의 자료는 제가 직접 번역한 자료들 입니다.

목차

주제 : SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동 첫번째 시간
실험목표 : Polyacrylamide Gel Casting
실험일시 :
실험도구 :

Introoduction

SDS-PAGE
1. SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)
2. SDS (Sodium dodecyl sulfate)
3. Polyacrylamide gel-구조
4. 불연속 버퍼 시스템(discontinuous buffer system)

Methods

Result

Discussion

References

본문내용

주제 : SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동 첫번째 시간
실험목표 : Polyacrylamide Gel Casting
실험일시 : 2008년 3월 25일 2:00p.m.~ 6:00p.m.
실험도구 : acrylamide/bis-acrylamide mix (in 30:0.8), Tris-HCl buffer(1.5M,pH8.8), Tris-HCl buffer(1M,pH6.8), SDS(10% in water), 10%APS, TEMED, 15ml tube 2개, pipette(p1000, p200, p20),glass plate, casting stand, diluted water

Introoduction

SDS-PAGE
1. SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)
SDS-PAGE는 단백질을 전기영동 이동성에 따라 분리하기위한 생화학적, 유전학적, 분자생물학적 방법이다. 단백질의 전기영동 이동성은 그것들의 polypeptide chain의 길이나 분자량과 관계가 있다. 또한 SDS-PAGE를 통해 분리하고자 하는 대부분의 물질이기도 한 단백질은 양쪽성을 띠며, pH에 따라 양의 charge를 가질 수도 있고 음의 charge를 가질 수도 있다. 즉, isoelectric point 보다 낮은 pH에서는 양의 전하를, 그보다 낮은 pH에서는 음의 전하를 띤다. 따라서 단백질 혼합물을 곧바로 전기영동처리하면 단백질은 일사분란하게 움직이지 않을 수도 있고, 분자량이 같은 단백질도 polypeptide chain
(후략)

2. SDS (Sodium dodecyl sulfate)
SDS는 음이온화 계면활성제로 일상 생활에서 치약이나 샴푸와 같은 생활용품을 농축시키고 거품을 생성하기 위해 사용된다. 실험실에서 일반적으로 SDS는 protein의 전기영동

2. Polyacrylamide gel-구조
Polyacrylamide gel은 단백질이나 DNA 조각과 같은 biomolecules의 전기영동에 사용되는 separation matrix 이다. Acrylami

참고 자료

http://blog.naver.com/jmy2legend?Redirect=Log&logNo=60045931585
http://en.wikipedia.org/wiki/SDS_PAGE
http://en.wikipedia.org/wiki/Polyacrylamide
http://blog.naver.com/syh1770/90024112574
http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm