도말법-streaking, spreading (미생물학 실험)
- 최초 등록일
- 2008.06.03
- 최종 저작일
- 2008.04
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소개글
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목차
1. 일 시
2. 조
3. 실험자
4. 제 목
Spreading)
5. 목 적
1. LB plate 에 E.coli를 도말하는 방법을 숙지한다.
2. 현미경 각부의 명칭과 구조를 이해하고 바른 사용법을 인지한다.
6. 준비물
7. 방 법
8. 결 과
9. 고 찰
본문내용
5. 목 적
1. LB plate 에 E.coli를 도말하는 방법을 숙지한다.
2. 현미경 각부의 명칭과 구조를 이해하고 바른 사용법을 인지한다.
6. 준비물
E.coli, LB plate, 알콜램프, 삼각 spreader, 백금이, incubator, 70% EtOH, 현미경
(저번시간에 만든 배지)
7. 방 법
1. spreader와 백금이를 70% 알코올이 담긴 비커에 담가 준비하고, LB plate를 준비한다.
(조원 4명이 5,10,15,20ul의 E.coli원액을 LB배지와의 양이 100ul가 되도록 희석 후 사용)
2. LB plate에 E.coli 100ul를 넣고, spreader를 화염멸균 하여 충분히 식혀 뜨겁지 않도록 한 뒤 도말한다. (배지의 모서리에 대어보아 배지가 녹지 않으면 식은것임)
3. LB plate를 양방향으로 돌려가며 도말하고, 찢어지거나 뭉치는 곳이 없도록 주의한다.
4. 도말이 끝난 spreader는 화염멸균하여 알콜이 담긴 비커에 담가둔다.
5. 다른 LB plate를 준비하고, 백금이를 화염멸균 한다.
6. 뜨겁지 않도록 식힌 후에 E.coli가 들어간 1.5ml tube에 담갔다가 뺀 후 도말한다.
(배지의 모서리에 대어보아 1차 도말은 면봉을 E.coli가 든 1.5mltube에 담궈
배지가 녹지 않으면 식은것임) 충분히 적신 뒤에 이 면봉을 가지고 배지에 도말 한다.
1차 도말은 약간은 촉촉할 정도로 충분히 도말 하여 준다.
7. plate를 돌려가며 4회에 걸쳐 도말하는데 많이 겹치지 않도록 하여 4회 때 single colony를 얻을 수 있도록 도말한다. (streaking 도말의 목적)
8. 도말이 끝난 백금이는 화염멸균하여 알콜이 담긴 비커에 담가둔다.
9. Plate를 37℃ 배양기에 뒤집어서 넣고 15시간 이상 배양하여 자라나오는 콜로니를 관찰한다. (색깔, 크기, 모양, 광택 등)
참고 자료
http://cafe140.daum.net/_c21_/bbs_search_read?grpid=egqq&fldid=4qpn&contentval
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%20%BC%F8%BC%F6%BA%D0%B8%AE
- http://mybox.happycampus.com/chlwldus5212/2146546