Protein extraction from Mouse liver

소개글

Protein extraction from Mouse liver

목차

Protein extraction from Mouse liver
1. Introduction
1.1. 이론
1.2. 목적
2. Materials and Methods
2.1. Materials
2.2. Methods
3. Results and Discussion
3.1. Result
3.2. Discussion

본문내용

1. Introduction
1.1. 이론
이번 실험에서는 포유류 조직의 용해질을 준비하기 위해, 균질기와 초음파발생장치의 사 용 방법을 사용한다. 이 방법은 ProteinChip 기술을 사용하기 위해 필요한 데이터를 얻는 데 성공적으로 사용되고 있다.
균질(homogenization)은 부드러운 조직을 파괴하는 가장 일반적인 방법 중의 하나이다.
이 방법의 장점은 소요 시간이 적고, 다른 세포구성물의 단백질분해요소로부터 떨어져서
상대적으로 단백질에게 안전하다.
초음파발생장치는 세포벽을 기계적으로 파괴시키는 진동을 발생함으로서 세포막을 파괴한 다.
위의 두 방법은 물리적인 방법으로 세포의 구조를 파괴하는 방법이고, Lysis buffer는 화 학적인 방법으로 세포의 구조를 파괴한다.
현재 어떤 종류의 세포나 조직을 용해시키는 표준적인 방법이 가능하지만, 세포 파괴 과 정이 이후 모든 과정의 기초인 만큼, 파괴 과정 중 실험자가 알고자 하는 단백질에는 유 해해서는 안 되기 때문에, 몇 가지 경우에서는 단백질의 수득률을 높이거나 활성 단백질 의 복구를 최대화시키기 위해 다른 용해 방법을 개발하는 것이 필요하다.

1.2. 목적
쥐의 간에서 단백질을 추출한 후, 흡광도를 측정하여 전체 단백질 양을 계산한다.

2. Materials and Methods
2.1. Materials
Mouse liver
Liquid nitrogen
Urea lysis buffer (Urea 9.5 M, CHAPS 2 % (w/v), DTT 1 % (w/v))
Ceramic mortar & pestle
Homogenizer
Sonicator
Ultracentrifuge

2.2. Methods
실험 1. 실험 과정
1) Ether 마취 상태에서 쥐를 경추 탈골로 안락사 시킨다.
2) 쥐의 간을 적출한다.
3) 간을 약 500 ㎎ 정도의 무게로 달아서 나눈다.

참고 자료

없음