미생물 및 식물 동식물 세포의 관찰

소개글

a. 그람염색(Gram staining)에 의한 세균세포의 관찰
b. 식물세포 관찰 - 양파세포

목차

1. introduction
2. 실험 재료 및 기구
3. 실험 방법
4. 실험 결과
5. 토의
6. 참고문헌

본문내용

a. 그람염색(Gram staining)에 의한 세균세포의 관찰
① 접종에 사용할 루프를 불꽃으로 멸균시키고, 식힌 다음 이미 준비되어 있는 세균 배양액을 슬라이드글라스에 한 루프 옮겨서 문지른다. (주의: 루프를 내려놓기 전에 불로 달구어 멸균을 시킬 것).
② 슬라이드글라스에 루프로 문질러 놓은 것이 마르도록 기다리는 동안에 다른 세균배양액도 동일한 방법으로 슬라이드글라스에 옮긴다.
③ 마른 슬라이드글라스의 세균을 알코올 램프 불꽃 위로 신속히 통과시키면서 열고정한다.
④ 슬라이드글라스를 그릇 위에 올려놓고 세균이 있는 곳에 crystal violet 용액을 몇 방울 떨어뜨린다. 1분을 기다린 다음 물로 슬라이드글라스를 가볍게 수초간 세척한다.
⑤ Iodine mordant를 몇 방울 떨어뜨리고, 1분을 더 기다린 다음 다시 물로 슬라이드글라스를 가볍게 수초간 세척한다.
⑥ 95% 에탄올로 20 - 30 초간 탈색시키고 역시 물로 세척한다.
⑦ 10초간 safranin으로 대응염색(counter stain)한 후 다량의 물로 남아있는 염색물질을 씻어낸다.
⑧ 슬라이드글라스를 여과지로 찍어 말리거나 공기 중에서 말린 다음 현미경으로 관찰한다(1000 배로 관찰할 것). 세균의 모양과 색깔을 비교하여 그 결과를 실험보고서에 기록한다. 이때 보라색의 세균은 그람양성, 분홍색으로 보이는 세균은 그람음성이라고 한다.

b. 식물세포 관찰 - 양파세포
① 신선한 양파를 약간 잘라서 표피부분(5mm 정도)을 면도칼로 조심스럽게 떼어낸다.
② 슬라이드글라스 위에 물을 한 방울 떨어뜨리고 떼어낸 표피를 물 위에 고루 펴서 놓는다(주의: 접히지 않도록 할 것).
③ 커버글라스를 덮고 여분의 물을 여과지로 닦아낸 후 먼저 저배율(100 배)에서 관찰한 후 고배율로 관찰한다.
④ 관찰이 끝난 후, 아세트산카민으로 염색(5분)하고 보이지 않았던 어떤 다른 구조가 있는지 관찰한다.

c. 동물세포 관찰 - 구강상피세포
① 면봉으로 입 속 뺨 표면을 가볍게 긁는다.
② 이 때 묻어나온 세포를 슬라이드 글라스위에 가볍게 문지른다.
③ 2-3분 후에 재료 위에 70% 에탄올을 떨어뜨려 고정시킨다.
④ 1-2분 후 슬라이드 글라스를 물로 씻고 1% 메틸렌블루를 떨어뜨린 후 2-3분 염색한다.
⑤ 저배율에서 관찰한 후 고배율에서 관찰한다.

참고 자료

- 한국배지(주) http://hankukm.com.ne.kr/GramStain.htm
- http://commons.wikimedia.org/wiki/Image:Escherichia_coli_Gram.jpg
- www.todayinsci.com/2/2_26.htm
- www.postech.ac.kr/class/ls209/exp_3.html
- http://yonggulee.egloos.com/tag