[동물생리학] Cryostats
- 최초 등록일
- 2008.09.03
- 최종 저작일
- 2007.12
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소개글
동물생리학 실험 레포트
Cryostats
목차
1. cryocut
2. 동결절편 (Frozen section)
1) 목적
2) CO2 동결박절법(satorius type)
3) Cryostat(전기식 동결절편기)
4) 동결시 온도
5) OCT compound
3. 동결박절법에 의한 조직절편 제작과정
(1) Inpregnation (침투)
(2) Embedding (포매)
(3) Microtome cutting (박절)
(4) Stain (염색)
(5) Mounting (봉입)
본문내용
Ⅰ.Introduction
1. cryocut
cryocut은 침투제를 사용하지 않고 단순히 조직 내에 포함된 수분을 낮은 온도에서 열림으로 조직을 경화시켜 박절하는 방법으로 동결박절(frozen section)이라 한다. 동결박절법은 침투제를 사용할때 거쳐야 하는 여러 가지 탈수제나 투명제로 인한 여러 가지 세포성분의 유실이나 손상을 피할 수 있다. 원래 일반작인 조직표본을 제작하려는 목적으로 개발된 방법이었지만 현재는 여러 가지 약물에 의해 용해성물질의 증명이나 응급시 신속한 표본제작에 주로 이용되고 있다. 동결박절법은 paraffin 침투 표본 제작과정과는 달리 조직의 경화과정이 불과 2-3분 정도밖에 소요되지 않기 때문에 조직 표본제작이 10분 이내에 가능하다. 동결박절의 이런 신속한 표본제작의 특성을 이용하여 수술 도중 종양의 전이여부 등을 판정하여 수술범위를 결정하고자 하는 경우와 같이 응급한 표본제작이 필요한 경우 동결박절법이 이용되고 있다. 일반적으로 조직을 얇게 박절하기 위해 침투제를 사용하여 조직을 경화시키는 파라핀박절법으로 조직을 박절하지만 동결박절법은 탈수, 투명, 침투 등의 과정을 거치지 않고 절편을 제작하는 방법이다. 파라핀박절법은 형태학적 보존에 적합하도록 발전되어 왔으나, 보통 실험실에서는 영구프레파라트 조직표본 제작을 위한 파라핀 방법 외에도 조직 병리학적 진단을 보다 신속하게 수행하기 위해 cryocut(cold-knife법)을 이용한 동결박절법을 수행하고 있다. Cryocut은 필요에 따라 온도조절이 가능한 냉장고형 캐비넷으로 내부에 박절기가 장착되어 있고, 작동장치들은 외부에 부착되어 있다. 또한 이중의 투명한 플라스틱 커버를 통하여 밖에서도 쉽게 내부를 관찰할 수 있으며, 캐비넷에는 성애제거 에 필요한 공기순환장치가 있다. 내부에는 박절기와 한쪽에는 4∼6개의 metal block carrier를 끼울 수 있는 선반이 있고 그 위에 열추출기(heat extractor)가 설치되어 있다. 내부 온도는 +10∼-35℃까지 조절할 수 있다.
2. 동결절편 (Frozen section)
1) 목적
- 수술 중 신속한 표본 제작(진단을 위해 ,악성유무)
- 지방이나 효소와 같은 특정물질 검출시(60℃이상에서 효소가 불활성화 되기 때문)
- 면역 조직화학적 검사 - 파라핀 절편은 항원이 소실될 우려가 있으므로
2) CO2 동결박절법(satorius type)
참고 자료
1. Michael H. Ross, 조직학 II, 군자출판사, 2004, pp278~294
2. 고정식, 조직학, 고문사, 2002, pp8~14
3. 조직학교재편찬회, 조직학, 고문사, 1997, pp9∼18