[식물생리학] 형질전환 식물의 제작 (discussion 포함)

소개글

식물생리학 실험 레포트
형질전환 식물의 제작

목차

Ⅰ. Introduction
▷ Agrobacterium으로부터 plasmid 분리
1. 식물숙주
2. 플라스미드 DNA의 정제
(1) 크기에 기초한 분리
(2) 구조에 기초한 분리
(3) 플라스미드 증폭

▷ Transformation of Plant cells
1. 아그로박테리움을 이용한 형질전환 식물
2. 아그로박테리움을 이용한 식물의 형질전환 방법

▷ GUS TEST
1. GUS Test(assay) : β-glucuronidas(GUS)
2. Assay
(1) Fluorimetry assay
(2) Histochemical assay(histostaining assay)
3. GUS test의 문제점과 대안

Ⅱ. Discussion

Ⅲ. References

본문내용

Agrobacterium으로부터 plasmid 분리
1. 식물숙주
식물세포 배양은 농업과 식물생리학 연구에 널리 사용되고 있으며, 농작물 생육의 개선을 실제로 많이 사용되고 있다. 식물세포 배양의 눈에 띄는 현상은 적당한 조건하에서 하나의 식물체로는 완전한 식물로 될 수 있고, 또한 이드로부터 종자를 얻을 수도 있다는 것이다. 그러므로 원하는 형질의 유전자를 유전공학적으로 삽입하며 커다란 상업적 가능성을 가져올 것이다.
유전공학의 피수적인 부분으로서 식물유전자 클로닝벡터가 필요하다. 한 가지 시도로서 식물 DNA 바이러스를 이용하여 왔다. 약간의 식물바이러스는 DNA를 포함하고, 한 가닥(Deminiviruses) 또는 두 가닥의 DNA 바이러스(Caulimoviruses)가 알려져 있다. 식물바이러스에 대한 연약한 지식과 식물세포의 배양 생장속도가 느리므로 유전공학이 별로 진전을 보지 못하고 있다. 그러나 또다른 시도로서는 Agrobacterium tumefaciens같은 식물병원성 세균을 사용하는 것이다 이 미생물은 종양의 형성으로 기인하는 질병인 crown gall을 일으킨다. 이 세균은 병독성(virulence)을 가지는 Ti plasmid 중의 T-DNA가 식물세포의 게놈에 결합되면 식물세포가 제어를 받지 않고 분열을 계속하여 종양을 유도하게 된다. 이것을 이용하여 유전자를 도입하려는 시도가 활발히 진행되고 있는 것이다.
식물체에서 tumor의 발생은 시물세포내에서 opine이 합성되기 때문이다. Opine은 특이한 아미노산 유도체로서 정상조직에서는 발견되지 않는다. Opine 중에 가장 흔한 것이 octopine와 nopline이 있다. 이 세균은 이들을 합성할 수도 있고, 그것을 사용하여 에너지원으로 사용할 수도 있다.

참고 자료

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2. 식물생리학, 권덕기 외, 2001, 을유문화사, pp41~44
3. 최신생물공학, 정재동 외, 1999, 경북대학교출판부, pp56~81
4. 유전, 한국유전학회, 도서출판 정아, 1997, pp58~61
5. 빈철구 저, 식물 발생공학의 미래, 서원출판, 1993, pp47~54
6. W.G. 홉킨스, 식물생리학, 을유문화사, 2001, pp299~364