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transformation

*중*
최초 등록일
2008.09.06
최종 저작일
2006.11
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소개글

transformation(형질전환)에 대한 자료입니다.

목차

1.subject
2.objectives
3.introduction
4.materials and methods
5.results
6.discussion

본문내용

<Objectives>
Recombinant DNA technology의 기초적 개념이해, Bacterial transformation을 통해 transformation을 이해하고 bacterial transformation 결과 형성된, colony counting을 통해 transformation efficiency를 계산해 본다.

<Introduction>
1. Competent cell - competence
정상적인 bacteria에 화학적 처리를 하여 DNA가 잘 들어갈 수 있도록 만든 cell을 competent cell이라 하며, cell이 외부 DNA를 받아들일 수 있는 상태가 된 것을 competent라 한다.
화학처리에 사용되는 시약은 calcium chloride, maganase chloride, hexamminecobalt chloride, dimethyl sulfoxide(DMSO)이다. competent cell에 42℃에서 1~2분간의 Heatshock을 가하면 외부 DNA의 bacteria로의 진입이 더욱 효율적이 된다.

2. Vector
하나의 organism에서 또 다른 organism으로 DNA sequence를 운반해 주는 운반체로서, 유전공학적으로 design될 수 있다. vector는 다음의 5가지로 분류할 수 있다.
1) colning vector
DNA를 한 cell에서 다른 cell로 transfer하는데 사용되는 vector.
cloning vector는 restriction sites가 존재하여 sticky ends가 만들어지고, 여기에 cloning될 DNA가 쉽게 ligation 된다.
2) expression vector
λ phage vector가 많다. inserted DNA sequence 가 protein을 coding하는 sequence의 일부로 기능하여 fusion protein의 expression으로 나타나는 경우이다.

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