면역세포의 분리 및 분석

소개글

면역세포가 생성되는 기관은 1차 면역기관이고 thymus가 여기에 해당된다. 1차 면역기관에서 형성된 면역세포가 활성되어 활발히 증식하는 기관은 2차면역기관이며 spleen이 이에 해당한다. 쥐를 해부하여 심장 위에 있는 thymus와 간 뒤에 있는 spleen을 얻어서 CD4, CD8, CD3, B220에 대한 항체로 형광염색을 하여 FACS를 찍어 각각 조직에서 CD4 Tcell과 CD8 T cell및 T cell과 B cell의 비율을 알아본다.

목차

[Abstract]
[Theory]
1.FACS
2.Thumus
3. Spleen
4.T cell과 B cell
5. 면역기관
[Materials & Methods]
[Data & Result]
[Discussion]

본문내용

이번 실험은 1차 면역기관인 thymus와 2차 면역기관인 spleen을 쥐에서 얻어서 single cell로 깬 후 T cell receptor인 CD4, CD8을 염색하여 thymus에서 그 비율을 살펴보고, T cell receptor인 CD3과 B cell receptor인 B220을 염색해서 spleen에서의 그 비율을 살펴보았다.
1차 면역기관인 thymus에서는 T cell이 생성되는데, 표면 단백질이 CD4인지 CD8인지에 따라 2그룹으로 나뉜다. CD4는 면역 촉진 세포이고(다은 면역 세포를 활성화시킨다.) CD8은 면역 억제세포이다(병원균 침입한 세포를 직접 죽인다). 만약 CD4가 너무 왕성하다면 자가면역증에 걸리게 되고 CD8이 너무 왕성하다면 외부 병원균에 대한 면역 시스템이 제대로 작동하지 않게 된다. 따라서 이 비율이 적당하게 유지되어야 정상적인 삶을 영위할 수 있다. 성숙 초기에 T cell은 항원 receptor 주위에 CD4와 CD8을 둘 다 모두 표현하는 double positive(DP)시기를 거친 후 negative selection에 의해 둘 중 하나만 표현하여 single positive(SP)가 된다. T cell receptor는 MHC에 결합된 항원을 인식하는데, 이때 필요한 것이 self MHC이다. 즉 자신의 MHC와 병원균의 MHC인데, MHC가 자기 것이 아닌 경우는 인식하지 않고 병원성이라고 인식하게 된다. 따라서 T cell은 우선 자신의 MHC를 인식할 수 있어야 하므로 positive selection을 통해 self-MHC와 reactive한 것을 먼저 선택한다. 자기 자신을 인식하지 못하는 것은 apoptosis 과정을 통해서 제거된다. 이렇게 선택된 T cell은 CD4와 CD8모두를 가지고 있으며 double positive 시기이다(positive selection). 여기까지가 thymus에서 존재하는 early T cell의 상태이다. 그 다음으로 자가 면역의 원인인 self-MHC

참고 자료

http://cafe.naver.com/legacydiet.cafe?iframe_url=/ArticleRead.nhn%3Farticleid=264
http://kin.naver.com/detail/detail.php?d1id=11&dir_id=110205&eid=l1YKoD8/dLkjxF8nEb+0rn3YLWfxuPYg&qb=bmVnYXRpdmUgc2VsZWN0aW9u&pid=fZ6eAdoQsDlssZ5R8ahsss--075549&sid=SEKRWn5lQkgAABx0ztI
http://www.scieng.net/zero/view.php?id=tech&page=1&category=&sn=off&ss=on&sc=on&keyword=&select_arrange=hit&desc=asc&no=2047
http://www.scieng.net/zero/view.php?id=tech&page=1&category=&sn=off&ss=on&sc=on&keyword=&select_arrange=hit&desc=asc&no=2047
http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/B/B_and_Tcells.html
http://en.wikipedia.org/wiki/Spleen
http://en.wikipedia.org/wiki/Thymus