Exp.4. Restriction Enzyme Digestion

소개글

plasmid를 제한효소를 이용하여 digestion하는 실험입니다.

목차

Introduction
제한효소(restriction enzyme)
제한효소와 특성
제한효소의 인식부위와 서열모양

본문내용

Introduction
제한효소(restriction enzyme)
제한효소는 세균바이러스의 증식을 막아주는 효소로 침입한 바이러스의 DNA를 절단하는 효소로 발견되어 바이러스의 증식을 제한(Restriction)한다하여 붙여진 이름이다. 숙주 세포의 핵산분해효소 (제한효소)가 바이러스의 특정한 염기배열을 인식하여 그 부위를 절단하여 바이러스의 Genome을 파괴한다. 제한효소는 이처럼 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 2중 사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제(핵산분해효소의 하나)로서 유전공학에서 재조합 DNA(디옥시리보핵산)를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소로 알려져 있는데, 여기서 말하는 제한이란, 이질의 숙주 중에서 증식한 DNA의 침입을 받았을 때 그 DNA와 자기의 DNA를 식별하고 분해해 버리는 현상을 말하며, 그런 작용을 하는 효소를 제한효소라고 한다. 이에 반하여 제한효소가 인식하는 염기배열 중의 특정한 염기를 메틸화하여 제한을 받지 않는 상태로 DNA를 일시적으로 변화시키는 현상을 ‘수식’이라고 하고, 이런 작용을 하는 효소를 수식효소라고 한다. 특정한 염기배열을 인식하여 그 염기배열만을 절단하는데 대략 4-8개의 염기배열을 인식하여 절단하는 제한효소가 유용하다. 제한 효소는 자신이 인식하는 염기배열을 절단할 때 그림과 같이 돌출된 부분은 만들 수 있으며, 이들 돌출된 부분은 서로 상보적이기 때문에 다시 서로 수소결합을 통하여 결합하게 되며, 유전자 분리 (클로닝)에까지 이용한다.
제한효소와 특성
Restriction enzyme은 (절단양식이나 활성발현인자 등)에 의해 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ형의 3군(群)으로 대별된다.

참고 자료

1. 장해영, 신분자유전학, 2001, 신일상사, p211~213
2. 황혜진 외 4명, Essentials of 유전학, 1997, 월드사이언스, p43, p77~80