토양미생물의 연속희석법

소개글

토양미생물의 연속희석법
연속희석법의 의미를 이해하고, 직접 실험하여 본다.

목차

없음

본문내용

5. 목 적
1. LB plate 에 토양속 미생물을 도말하는 방법을 숙지한다.
2. 연속희석법의 의미를 이해하고, 실습한다.

7. 방 법
1. 준비한 토양을 저울을 이용해 2g을 덜어 14ml tube에 덜어 3`DW 3ml을 넣고 잘 부유시킨다. -잠시 그대로 두어 흙입자가 모두 가라앉게 둔다-
2. spreader와 백금이를 70% 알코올이 담긴 비커에 담가 준비하고, LB plate를 준비한다.
3. 토양의 입자는 모두 가라앉고, 위에 부유된 상층액 1ml을 1.5ml tube에 모은다. -이것이 원액-
4. 3개의 1.5ml tnbe에 1/10, 1/100, 1/1000 이라고 적은뒤 각각에 DW 900ul씩 준비하고, 원에서부터 100ul를 순차적으로 Dilution한다.
5. 준비된 4개의 tube에서 100ul를 준비된 LB plate에 덜어 spreader를 이용해 알콜램프 주위에서 도말한다.
6. 도말한 LB plate를 15시간 이상 incubation후 얻어진 토양세균의 colony 수를 계산한다.
7. 300개 이상은 개수하지 않고, 300개 이하의 plate를 선정하여 개수하고, 각 시료 1ml에 들어있는 수를 계산하고, 최종적으로 토양 1g에 들어있는 세균수를 계산한다.
※ 1ml 당 E.coli 수 계산
= colony 수 x 희석률 x 10 ( 100㎕ 를 사용했으므로)

참고 자료

http://blog.naver.com/jeney69/30021779246
http://cafe350.daum.net/_c21_/bbs_search_read?grpid=1Alvt&fldid=3hGX&
contentval=00017zzzzzzzzzzzzzzzzzzzzzzzzz&nenc=elG-wjTaG8FQZo69a
XWiLA00&dataid=69&fenc=vMCroEGY0&docid=1Alvt|3hGX|69|200803
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