소개글
DNA 추출과 전기영동 실험의 결과리포트입니다.
추출할 때의 방법 및 쓰인 시약들의 반응원리와 시약의 쓰임새, 그리고 단계별로 진행되는 실험의 이유를 자세히 조사하여 어려움없이 이해할 수 있도록 적은 리포트이니 좀 더 손쉬운 리포트작성과 함께 학점관리에도 많은 도움이 되리라 생각됩니다.
목차
PORPOSE
MATERIALS & SUPPLES
PROCEDURE
RESULT
DISCUSSION
reference
본문내용
1. 1. 1. PORPOSE
머리카락에서 DNA의 추출하고 이를 전기영동으로 직접 분리해 본다.
2. MATERIALS & SUPPLES
DNA extract solution : 〈TE buffer(10mM Tris-Cl, 1mM EDTA: pH8), 10% SDS(sodium dodecyl sulfate), Proteinase K〉
pincette, electrophoresis kit, microwave oven, pipette, loding dye(DNA dye라고도 함), EtBr, agar(우뭇가사리), D.W., Size Marker, E-tube, 커터칼, water bath, Beaker, 일회용 장갑
3. PROCEDURE
1. 머리카락을 15개 정도 뽑고 끝 부분을 커터칼로 1cm 정도 잘라 핀셋으로 E-tube에 담았다.
2. DNA extract solution을 pipette으로 50㎕정도 E-tube에 넣었다.(Fig.1)
3. E-tube를 water bath(Fig.2)에서 37℃정도로 30분 정도 놓아 두고 약 10분간격으로 E-tube를 흔들어 주었다.
(Fig.2) Water bath
4. 30분 뒤에 E-tube를 꺼내어 Centrifugation을 했다. (12000rpm, 5min, 17℃)
*Centrifugation을 할 때 E-tube의 뚜껑에 튀어나온 부분이 바깥쪽을 향하도록 하고 균형을 맞추어 넣었다.(Fig.3)
5. E-tube를 꺼내고 Supernatant에서 10㎕를 pipette으로 새로운 E-tube에 옮겨 담았다.
6. 그 E-tube에 Loding dye를 2㎕를 넣었다.
7. 전기영동할 1% agarose gel을 만들었다.
참고 자료
-1. 분자 세포 생물학(5th), 이한웅, 월드사이언스, 2006, p87~90
-2. Modern experimental biochemistry(2th), Rodney F. Boyer. Benjamin/Cummings, 1993
-3. Comparative analysis of the DNA staining efficiencies of different fluorescent dyes in preparative agarose gel electrophoresis, Huang Q, Fu WL, Clin Chem Lab Med, 2005;43(8):841-2
-3. http://www.celgentec.com
-4. http://blog.naver.com/selrim11?Redirect=Log&logNo=40017615700
-5. http://www.ntskeptics.org/1994/1994january/edta.gif
..기타등등