HPLC(기기분석 및 실험)

소개글

본 실험에 사용할 크로마토그래피는 HPLC이다. HPLC는 보통의 액체크로마토그래피에서 입자를 더욱 작게 하고, 가는 분리관을 사용해서 알맞은 압력을 가하여(입자를 작게 하면 액체의 통과가 느려지므로) 매를 흘리면, 기체크로마토그래피와 같은 속도로, 또한 뛰어난 분리기능을 얻을 수 있다. 최근 충전제 ·고압펌프 ·검출기 등의 기술적 문제가 해결되어 천연물 유기화학 ·임상화학 등의 분야에서 이용하게 되었다. 충전제는 10∼15μm의 다공질 중합체 또는 비다공질인 작은 입자에 실리카겔과 같은 것의 엷은 층을 만들어 여기에 액체를 입힌 것 등이 쓰인다. 도입 압력은 100∼3000psi정도이고, 검출기로는 차동굴절계 ·자외선분광광도계 등이 있다.

목차

Ⅰ. 실험목표
Ⅱ. 이론
Ⅱ-1. 크로마토그래피의 종류
Ⅱ-2. HPLC(High performance liquid chromatography)
Ⅱ-3. Ascorbic Acid
Ⅲ. 실험장치 및 시약
Ⅳ. 실험방법

본문내용

Ⅰ. 실험목표
HPLC(High performance liquid chromatography)가 무엇인지 이해하고, 이를 이용하여서 과일 쥬스 속에 있는 비타민 C를 분석해본다.

Ⅱ. 이론
크로마토그래피란 혼합된 시료성분이 Column의 고정상과 이동상을 통하여 흐르면서 시료가 고정상과 이동상에 흡착작용, 분배작용, 이온교환작용, 분자크기 배제 작용 등의 물리, 화학적작용의 차이를 일으켜 각각의 단일 성분으로 분리되는 형상으로 혼합물중의 각 성분을 분리, 정성, 정량 분석 혹은 분리, 정제 등을 위해 사용하는 분석기기이다.

Ⅱ-1. 크로마토그래피의 종류
① 종이크로마토그래피
종이에 검은 수성 사인펜으로 점을 찍은 후 수직으로 세워놓고 아래 부분이 물에 잠기도록하면 물이 종이를 따라 올라가면서 사인펜 속의 색소가 분리된다. 이때 종이처럼 고정되어 있는 물질을 정지상이라 하며, 물과 같이 위로 이동하는 물질을 이동상이라 한다. 색소들은 저마다 물을 따라 올라가는 속도가 달라 분리가 가능하다.

② 관 크로마토그래피
관 크로마토그래피의 경우, 관 속에 정지상으로 쓰일 물질을 채우고, 그 위에 시료혼합액과 함께 이동상을 흘려주면 정지상 사이사이로 시료혼합액과 이동상이 내려가게 된다. 이때도 역시 잘 흘러내려가는 시료가 있고 그렇지 못한 시료도 있어 통과 속도에 차이가 생긴다. 따라서 같은 길이의 관을 통과하는데 걸리는 시간이 시료마다 다르고, 이 시간 차이를 이용해 시료를 분리할 수 있다.

참고 자료

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