미생물의 순수분리,배양 및 접종

목차

Ⅰ. Subject
Ⅱ. Purpose
Ⅲ. Introduction

본문내용

2. 호기성 세균류의 순수분리 및 배양법
① 평판 배양법(Plate culture)
a. 코호평판배양법(Koch pour plate culture)
멸균한 무균작업대에 건열멸균한 petri dish 3장을 넣는다. 한편 고체 배지가 들어있는 시험관 3개를 더운 물 냄비 속에서 굳지 않게 하고 집적배양한 시료와 함께 면전은 화염멸균을 하고 버너는 승홍수로 살균하여 함께 무균작업대에 놓는다.
멸균한 백금이로 시료에서 한 백금이를 제 1의 시험관배지(40～45℃)에 넣어 잘 섞는다. 이 배지에서 다시 멸균한 백금이로 한 백금이를 제 2시험관배지에 넣어 섞고 또 멸균한 백금이로 한 백금이를 제 3의 배지에 넣는다. 이 3개의 시험관을 다시 잘 흔들어 미리 준비하였던 petri dish에 부어 냉각응고를 시키고 거꾸로 하여 배양기에 넣는다. petri dish를 거꾸로 하는 것은 배양기 속에서 물방울이 petri dish의 위쪽에 떨어져서 오염되는 것을 막기 위한 것이다. 이 방법에 따르면 제 1, 제 2, 제 3으로 희석됨에 따라 현탁되는 균수가 적게 되고 그만큼 순수한 집락을 만들게 된다. 이상의 평판들은 배양기에서 세균은 1～3일, 곰팡이는 5～7일 후에 집락을 만든다. 고립된 집락을 다른 배지에 이식(transper)한다. 검경 후 순수분리 되었다고 인정되면 사면배양 또는 천자배양을 하여 보존한다.
b. 평판도말 배양법(Streak plate culture)
약 10㎖의 고체배지를 만들어 무균작업대 속에서 prtri dish를 왼손에 쥐고 시료를 백금이로 채취하여 평행곡선을 그어간다. 도말이 끝나면 거꾸로 하여 배양기에 넣고 1～3일 후에 집락이 생기면 앞의 방법과 같이하여 보존 배양한다.
② 현미해부법(Micromanipulation)
이것은 많은 세포 중에서 원하는 것을 가려내는 방법으로 쓰인다. Zeiss사의 제품은 3차원으로 움직이는데 두폰브루네사의 제품은 한개의 핸들이 기압작용으로 편리하게 움직인다. 앞의 각종방법에 의하여 얻은 순수분리 미생물은 순수배양을 하여 다음의 연구에 쓴다.
③ 고체배양법
a. 사면배양법(Slant culture)

참고 자료

1. 이연해, <현대미생물학>, 탐구당, 1991년, P124～P127
2. Roger Y. Stanier, Jphn L. Ingraham, <최신 미생물학>, 아카데미서적, 2000년, P34～P49
3. 정재춘 외 4명, <환경미생물학실험>, 신광문화사, 1993년, P52～P57