total cholesterol 정량

소개글

total cholesterol 정량 실험 내용입니다.

목차

실험제목
실험일지
실험목적
시약 및 도구
기구

본문내용

실험제목 : total cholesterol 정량
실험일지 : 2004. 11월 22일 월요일
실험목적 : 혈청을 이용하여 total cholesterol을 측정해 볼 수 있다.
시약 및 도구
혈청
물 0.02ml(증류수)
효소용액
기준액
기구
①pipet
②tube
③water bath(37℃)
④흡광도 기계(spectronic 20)
실험내용(원리)
Ⅰ. Total cholesterol 정량
원리
혈청 중에는 유리형 및 에스터형 콜레스테롤이 존재하며 에스터형에 cholesterolester hydrolase 효소를 반응시키면 유리형과 지방산으로 분해되고 유리형에 cholesterol 산화 효소를 반응시키면 H₂O₂와 4-∂-cholesterol이 생성된다. 생선된 H₂O₂에 과산화 효소와 4-아미노안티피린 및 phenol을 동시에 반응시키면 산호적 축합반응으로 키논이 생성되며 이를 비색하여 콜레스테롤을 정량하게 되는 법이다.
측정방법
sample blank Standard 피검재료 혈청 0.02ml 물 0.02ml 기준액 0.02ml 효소용액 3.0ml 3.0ml 3.0ml 혼합 후 37℃수조에서 5분간 반응시킨 후 1시간 이내에 blank를 대조로 하여 sample 및 standard의 흡광도를 읽는다.
사용파장 500nm 계산법
혈청콜레스테롤(mg/100ml) = 300 ⅹ sample의 흡광도/standard의 흡광도
임상적 의의
증가 감소 혈 액 병 : 백혈병, 급성출혈초기
순환기병 : 고혈압, 동맥경화증
간 질 환 : 폐쇄성황달, 실질성황달(활동기)
실 질 환 : 네프로제
내분비질환 : 갑상선기능저하, 점액수종 당뇨병
지방대사장애 : xanthomatosis, niemann-pick disease 혈 액 병 : 만성출혈, 다혈증, 악성빈혈
순환기병 : 류마치성 심장병
간 질 환 : 중증실질성황달, 담관염, 간종양, weli병, 간경변증
신 질 환 : 사구체 신염
내분지질환 : 갑상선기능항진증, 췌장랑겔한스섬기능 항진증
기타 : 발영성 질환, 장폐쇄, 악액질, 기아
시약
100 tests
콜레스테롤 완충액 100ml ⅹ 3
효소시약(100ml 희석용) 3병
콜레스테롤 기준액(300 mg/100ml) 5ml
용법
효소용액 조제 : 효소시약(100ml 희석용) 1병을 완충액 100ml에 용해시켜 사용하고 이 용액은 2~10℃에 보존하여 3주일간 사용할 수 있다.
측정방법
검체 맹검 표준 피검재료 혈청 0.02 물 0.02 기준액 0.02 효소용액 3.0 3.0 3.0 혼합 후 37℃ 수조에서 5분간 반응시킨 후 1시간 이내에 맹검을 대조로 하여 검체 및 표준의 흡광도를 읽는다.

참고 자료

- 영양판정 – 이론 및 실험, 승정자 외 5인, 청구문화사, 1999.
- http://www.medidoctor.net/링크/콜레스테롤.htm
- http://preview.britannica.kr/spotlights/nobel/list/b21k3635a.html
- http://www.ksic.or.kr/home.html
- http://www.cuk.ac.kr/~ccnutra/yellow/Thema3/thema3-1.htm