paper chromatography

소개글

식품영양학과 식품화학과 기능성 실험 중

목차

1 . 실험제목
2. 실험자명
3. 실험의 원리
4. 실험 기구, 재료
5. 실험방법
6. 실험결과
7. 고찰

본문내용

3. 실험의 원리 : 혼합물로부터 그 성분들을 순수하게 분리하거나 확인, 정량하는데 사용하는 편리한 방법중의 하나이다. 혼합물이 정지상(stationary phase)이나 이동상(mobil phase)에 대한 친화성이 서로 다른 점을 이용하는 것이다. 친화성에 중요한 영향을 미치는 인자는 흡착, 이온화, 분배계수들 등 서로 합하여 작용한다. α-amino acid은 ninhydrin시약을 분무하면 보라색으로 발색한다.

4. 실험 장치, 재료 및 시약 :
․시료 : Lysine, Threonin, Methionine(각각 1% 용액), 3종류를 동량 섞은 혼합용액
․기구 : 전개조(전개용매로 포화상태), paper(여지), pipette, 분무기, 건조기
․시약 : n-butanol : acetic acid : water = 4 : 1 : 2(전개용매)
0.1% ninhydrin/butanol 용액(발색제) : n-butanol 100ml에
0.1g의 ninhydrin을 용해하여 조제

5. 실험방법:
① 전개조에 전개용매를 넣어 포화상태로 한다. (하룻밤정도)
② 여지 또는 plate의 하단부로부터 2cm 떨어진 곳에 micro pipette을 이용하여 각 시료들을 spot한다(spot 한 것이 3mm정도 되도록 하며, 각 시료와의 간격은 2.5cn로 함.)
③ 5~10분간 건조시킨 후 위의 과정을 4번 반복한다.
④ 전개조에 spot한 여지와 plate를 넣어 용매를 전개시킨다.
⑤ 여지는 1시간 30분, plate는 2시간 전개 후 여지 또는 plate를 꺼내서 받침대에 끼워서 실온에서 50분간 방치하여 용매를 증발시킨다.
⑥ 0.1% ninhydrin butanol(발색시약) 용액을 분무한 후 110℃ 건조기에서 15분간 발색시킨다.
⑦ spot의 가운데 지점에 점을 찍어서 Rf치를 계산한다.
[계산]

참고 자료

※ 식품화학실험, 하정욱 저, 형설출판사 2003년, 344~346p
※ 식품화학실험, 신효선 저, 신광출판사, 1997년, 58~60p
식품분석법, 주현규․조광연․박충균․조규성․채수규․마상조 공저, 유림문화사, 1995년, 127p~129p