[분자생물학 실험] Genomic DNA Extraction

소개글

생물학과 분자생물학 실험 리포트 입니다.

목차

1. Title
2. Material
3. Method

본문내용

1. Title
Genomic DNA 분리

2. Material
1. 준비한 조직을 잘게 뭉갠 후 앞서 만들었던 DNA extraction buffer에 넣는다.
2. Proteinase K의 단백질분해를 위해 37℃ ~ 45℃에서 3시간 ~ 밤새 인큐베이션 시킨다.
3. 1.5mL tube에 인큐베이션 시킨 용액을 500㎕ 넣고, 이어서 페놀 400㎕를 넣는다.
4. 조심스럽게 섞어준 후 층이 질때까지(약 15분간) 방치한다.
5. 12000rpm에서 5분간 RT(실온)에서 원심분리한다.
6. 상층액(약400~450㎕정도)을 새로운 tube로 옮기고 400㎕ chloroform을 넣는다.
7. 조심스럽게 섞어준 후 아까와 같이 12000rpm에서 5분간 RT(실온)에서 원심분리한다.
8. 상층부를 ~400㎕정도 다른 튜브로 옮긴 후, 부피의 2배만큼의 100% EtOH를 넣고 잘 섞어주면 하얀 pellet(DNA)가 생긴다.
9. 잘 섞은 후 20~30min standing 시킨다.
10. 12000rpm에서 3분간 4℃에서 원심분리한다.

참고 자료

없음